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PCR芯片是經過對Q-PCR體系優化而開發的PCR檢測體系??朔薗-PCR檢測基因表達數量少等不足之處,其同時可對多種基因進行研究,且可在更短的時間內得到更豐富的信息。PCR芯片實驗僅需2小時。PCR芯片可廣泛用于生命科學、生物技術、疾病檢測、臨床醫學和環境檢測等領域,是近年生命科學領域常用的研究手段之一。
更新時間:2020-05-14
PCR芯片是經過對Q-PCR體系優化而開發的PCR檢測體系??朔薗-PCR檢測基因表達數量少等不足之處,其同時可對多種基因進行研究,且可在更短的時間內得到更豐富的信息。PCR芯片實驗僅需2小時。PCR芯片可廣泛用于生命科學、生物技術、疾病檢測、臨床醫學和環境檢測等領域,是近年生命科學領域常用的研究手段之一。
PCR芯片實驗過程:
1. 將RNA樣品反轉錄為cDNA鏈,作為PCR模板。
2. 將模板加入到反應體系(RT2Real-TimeTMSYBRGreenPCRMasterMix)中。
3. 在已經固定好基因特異性引物的96孔板各孔中,加入等量的PCR反應體系,進行PCR反應。
4. 采用儀器配套的軟件計算PCR芯片中的每個基因的循環閾值(Ct)。
5. 后,采用△△Ct方法比較對應的兩個樣本中同一基因的表達量變化。通過分析看家基因Ct值的一致性,可確定合適的標準化方法。芯片所設置的對照,可以檢測PCR體系中是否存在DNA污染,或者是否有影響反轉錄或PCR實驗步驟的因素存在。
該技術存在一定技術難度,主要難點在與相同的PCR反應條件下保證不同的基因有相近的擴增效率,并且獲得與單個基因實時定量PCR反應相當的靈敏度,特異性和可重復性。因此需進行PCR引物和反應條件的優化。
與普通PCR相比,PCR芯片具有整體性,操作簡便,效率高,反應體系小,便于集成化,結果可靠等優勢。
服務流程
1. 提取樣本RNA
2. RNA質量檢測
3. cDNA模板制備
4. 數據處理