嵌合IgG抗體構建

技術背景：

人-鼠嵌合抗體：利用DNA重組技術將鼠源單抗的輕鏈、重鏈可變區插入含有人抗體恒定區的表達載體中，轉化哺乳動物細胞進行表達所產生的單克隆抗體。人-鼠嵌合抗體的人源化程度可達到70%，完整的保留了鼠源單抗的可變區，大限度的保留了親本活性，人抗體恒定區的引入則大大降低了免疫原性。

隨著分子生物學技術的迅猛發展，為克服鼠源性單抗的異源性反應，人工改造鼠源性單克隆抗體成為現實。1984年出現了嵌合重組抗體技術，1994年美國批準嵌合抗體藥物上市，至今嵌合抗體藥物總數已有多個，包括Abciximab，Basiliximab，Pdtmximab，Cetuximab等。

上圖：利妥昔單抗：人CD20特異的嵌合單克隆抗體。

IgG抗體分子由2個重鏈和2個通過二硫鍵連接的輕鏈組成。

基本原理 ：

人鼠嵌合抗體基本原理是從分泌某種鼠單抗的雜交瘤細胞基因組中分離并鑒定出重排的功能性鼠VL（輕鏈可變區）和VH（重鏈可變區），經過基因重組分別與人的CL（輕鏈恒定區）和CH（重鏈恒定區）區基因按照一定的方式相拼接，克隆到表達載體中構建鼠/人輕重鏈基因表達載體，并轉入適當的宿主細胞表達來制備特異性嵌合抗體。

對于其他類型的人源化抗體，其優勢在于，技術路線簡單，易于操作；抗體完整性好，在體內滯留時間長；鼠源抗體的親和力和特異性都得到保留，在臨床上得到了良好的反應。

構建人鼠嵌合抗體主要包括：克隆鼠抗體可變區基因，釣取人抗體恒定區基因，拼接鼠抗體可變區基因與人抗體恒定區基因以及構建載體和宿主細胞。

嵌合抗體的分類 ：

上圖：嵌合Fab抗體

選擇我們：

鼠單抗因為在體內可以引起HAMA（Human anti-mouse antibodies）反應，臨床上的應用受到了極大的限制。隨著基因重組技術的發展，人們可以對鼠源單克隆抗體進行改造，研究者們便發現了人鼠嵌合抗體—這一早誕生的基因工程抗體。

其有顯著的優勢：保留親本的高特異性和高親和力，在體內有較長半衰期，易于操作等。但是嵌合抗體雖然可以部分解決異種蛋白的排斥問題，但由于其還含有鼠源V區，依然有可能會誘發HAMA反應，干擾抗體療效，誘發超敏反應，在臨床上其應用會受到一定限制。所以隨著基因工程技術，細胞工程技術等生物技術的飛速發展，研究者們又相繼改造出了人源化抗體和全人源抗體。相信在相關技術的驅動下，單抗會更快更好的適用于臨床，從而造福于人類。

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