熱門關鍵詞:抗體類,蛋白類,分子細胞類,化學品與試劑
隨著重組蛋白技術的進一步完善,真核哺乳動物細胞蛋白表達系統憑著蛋白折疊和完善的翻譯后休息系統,表達的抗體更接近天然構象,從而具有和天然抗體相同的生物活性,因此常用于功能蛋白、抗體及臨床疫苗的生產。艾柏森生物提供工業級別重組IgG、Fab和ScFv等抗體片段的制備和純化服務。
瞬時轉染表達
瞬時轉染(transienttransfection)是將重組抗體基因導入真核細胞的方式之一。在瞬時轉染中,重組DNA導入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時但高水平的表達。轉染的DNA不必整合到宿主染色體,可在比穩定轉染較短時間內收獲轉染的細胞,并對溶解產物中目的基因的表達進行檢測。艾柏森提供從基因優化、載體構建、瞬轉HEK293細胞/CHO細胞、表達純化小試以及大規模發酵服務??梢远虝r間內生產mg至g級重組IgG。
構建穩定細胞系
構建目的基因的表達質粒后,可通過電轉、慢病毒轉染等方法,將質粒轉染至宿主細胞。選用DHFR /GS基因表達系統,將轉染的細胞培養在合適的選擇性培養基中,然后進行MTX/MSX壓力篩選,以產生穩定細胞庫。
艾柏森生物使用MolecularClonePix2系統,高通量、自動化的篩選出100-200個高水平分泌克隆,并從中挑選最佳10-20個高產克隆,進行下一步的穩定性測試。我們挑選出*的10個克隆,進行10次傳代后,qPCR和WB法檢測細胞株的穩定性。我們提供序列及載體報告, 3株表達zuihao的細胞株,表達分析、穩定性測試報告以及詳細的穩定細胞株構建報告。