熱門關鍵詞:抗體類,蛋白類,分子細胞類,化學品與試劑
您是否有過這樣的經歷……
新買到的細胞或者實驗室傳了幾代的細胞,又或者是儲存于超低溫冰箱幾年不用的細胞, 需要用到時腦海里一直有著這樣的問題困擾著你,被污染了么? 鑒定正確么?用它做研究會影響實驗結果么?
據統計約30%細胞系被交叉污染或錯誤辨識,只因使用了交叉污染或錯誤辨識的細胞而導致研究結論錯誤、結果不可重復、臨床細胞治療災難性后果……,這將浪費大量時間、精力和金錢。
為什么要進行細胞系鑒定?
進行細胞系STR鑒定是很重要的。很多生物醫藥的研究都采用培養細胞來進行,這些細胞可能是受贈于其它研究人員,也可能是從細胞庫(如美國?ATCC,American?Type?Culture?Collection)得來。據估計,15-20%的實驗室,實驗中所使用的細胞已經不是原來的細胞系,或者與其它細胞系發生了交叉污染。顯然,細胞系遭到污染、特征鑒別錯誤,將會極大的威脅著基于這些細胞而發表的論文質量和研究發現的正確性。
什么細胞最容易污染別的細胞?
Hela 細胞。五十多年來,Hela細胞系被廣泛用于醫學和生物學領域的研究,對當代生命科學的發展屢建奇功,是名副其實的生物學研究的親歷踐行者。同時很多被廣泛研究的細胞系都被Hela細胞淹沒,因為它長得快,當你發現自己的一個培養瓶里的細胞突然長得很好,而以后都用它傳代做實驗的話,十之八九是搞錯了。
什么情況下需要細胞系鑒定?
1)當建立或獲得一個新的細胞系時;
2)一個涉及到細胞試驗項目開始/結束時;
3)在細胞凍存之前,或細胞已連續培養 2~3 個月時;
4)發表文章或申請課題經費前;
5)細胞系表現不穩定或結果與預期差別較大時;
6)當實驗室使用超過一種細胞系時,所有細胞系最好先鑒定以排除交叉污染的可能;
如何根據STR數據判斷細胞系身份?
收到細胞系鑒定結果以及 STR 信息,可以與參考數據庫進行比對。如果細胞樣本的每個 STR 位點和參考細胞 STR 位點都能重合匹配,即說明該細胞系正確,反之則說明你的細胞系可能被錯誤標記,交叉污染或發生遺傳不穩定。一般說來,匹配度≥80%即可認為該細胞系正確,匹配度<80%則說明該細胞系的來源需要被懷疑。
如果細胞系被鑒定出發生交叉污染或錯誤標記,則需要拿更早代數的細胞進行鑒定,從而找到問題的起源或者直接從可靠的機構購買一株新的細胞系。
艾柏森提供細胞系STR鑒定服務
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